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耐高溫乳酸菌的選育及應(yīng)用研究

2017-02-13 20:30:08      點擊:

摘要】 本實驗從青貯玉米飼料、果渣、牛奶、新鮮的泡菜汁等樣品中篩選耐高溫乳酸菌。通過初篩、復(fù)篩,獲得一株耐高溫且產(chǎn)酸能力較強的菌株L1;依據(jù)伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊和乳酸菌分類鑒定的標(biāo)準(zhǔn)和描述,對其進行了生理生化特性鑒定并確定其為乳桿菌屬(lacotobacillus)德氏乳桿菌(Lactobacillus delbbruecki)。對L1菌株進行He-Ne激光誘變育種研究,經(jīng)過多次誘變,在大量突變株中選到了一株耐高溫、產(chǎn)酸能力強的菌株TL1,在70℃高溫培養(yǎng)下突變株菌數(shù)量是原菌株的12倍,菌數(shù)量最多達1.275×109個/mL;且其具有良好的遺傳穩(wěn)定性。通過單因素試驗和正交試驗確定突變菌株TL1的最佳增殖培養(yǎng)基組分為:玉米粉16%+麩皮5%;在α-淀粉酶(5u/g玉米粉、90℃、30min)和糖化酶(150u/g玉米粉、55℃、2~3h)酶解作用下,最佳發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度60℃,發(fā)酵時間36h,pH值3.5。在青貯玉米應(yīng)用試驗中,結(jié)果表明:添加TL1菌后,腐敗菌隨著時間的延長總菌數(shù)最后為零;感官評定結(jié)果顯示:青貯飼料處理組效果明顯地優(yōu)于對照組的效果;對處理組和對照組的化學(xué)分析表明:處理組的丁酸含量降低為零,乳酸和丙酸的含量增加;酸性洗滌纖維含量降低了31.2%;木質(zhì)素含量降低了5%;氨態(tài)氮含量降低了36.4%;干物質(zhì)消化率提高了43.52%;飼喂試驗結(jié)果表明:奶牛的日產(chǎn)奶量可提高1kg以上,有顯著的增產(chǎn)效果。綜合以上結(jié)果得出:添加TL1菌后快速降低了青貯飼料pH值,顯著降低了青貯飼料的霉變程度,減少了青貯物料的損耗,提高了青貯飼料的品質(zhì)。在堆肥應(yīng)用試驗中,結(jié)果表明:添加TL1菌后pH值顯著下降;揮發(fā)性有機質(zhì)含量下降了50%;小麥種子發(fā)芽率提高了4%,綜合以上結(jié)果可以得出:添加TL1菌株顯著縮短了到達高溫期的時間,且高溫持續(xù)時間較長,改善了堆料的質(zhì)地,促進了腐熟的時間,提高了小麥種子的發(fā)芽率。

第一章 文獻綜述 11-34
1 耐高溫乳酸菌的研究概況 11-19
1.1 嗜溫乳酸菌的特性及有關(guān)科屬 11
1.2 嗜熱乳酸菌特性及有關(guān)科屬 11
1.3 微生物耐高溫機理探究 11-14
1.4 乳酸菌的鑒定方法 14-16
1.5 激光誘變育種 16-17
1.6 相關(guān)領(lǐng)域國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 17-19
2 乳酸菌在青貯飼料中的應(yīng)用 19-29
2.1 青貯及乳酸菌青貯添加劑的概念 19
2.2 青貯飼料的特點 19-20
2.3 青貯原理 20-22
2.4 青貯添加劑 22-25
2.5 青貯飼料中添加乳酸菌的目的 25-26
2.6 青貯飼料中乳酸菌種的選擇 26
2.7 影響乳酸菌青貯添加劑效果的因素 26-27
2.8 乳酸菌青貯添加劑的使用效果 27
2.9 相關(guān)領(lǐng)域國內(nèi)外技術(shù)現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 27-29
3 乳酸菌在生活垃圾堆肥處理中的應(yīng)用 29-32
3.1 生活垃圾堆肥技術(shù)的研究概況 29
3.2 堆肥的基本原理 29-30
3.3 堆肥化微生物的變化過程 30
3.4 微生物在高溫堆肥過程中的作用 30-31
3.5 乳酸菌在堆肥中的作用 31-32
3.6 相關(guān)領(lǐng)域的研究概況 32
4 立題意義和本論文的研究內(nèi)容 32-34
第二章 耐高溫乳酸菌的選育及鑒定 34-43
2.1 材料 34-36
2.2 實驗方法 36-37
2.2.1 乳酸細菌的分離、純化 36-37
2.2.2 耐高溫乳酸細菌的選育 37
2.2.3 耐高溫乳酸菌的鑒定試驗 37
2.3 結(jié)果與討論 37-42
2.3.1 分離的菌株 37-38
2.3.2 耐高溫乳酸菌的篩選 38-39
2.3.3 耐高溫乳酸菌鑒定結(jié)果 39-42
2.4 本章小結(jié) 42-43
第三章 He-Ne激光誘變育種 43-50
3.1 材料及儀器 43
3.2 實驗方法 43-45
3.2.1 菌株L1的He-Ne激光誘變育種 43-44
3.2.1.1 生長曲線的繪制 43
3.2.1.2 誘變參數(shù)的選定 43
3.2.1.3 菌懸液的制備 43
3.2.1.4 He-Ne激光誘變 43-44
3.2.1.5 存活率的計算 44
3.2.1.6 正突變率的計算 44
3.2.1.7 正突變菌株的性能考察 44
3.2.2 突變菌株的遺傳穩(wěn)定性分析 44-45
3.3 結(jié)果與討論 45-49
3.3.1 生長曲線測定結(jié)果 45
3.3.2 激光誘變試驗結(jié)果 45-47
3.3.2.1 第一次激光誘變結(jié)果 45-46
3.3.2.2 正突變菌株的獲得 46-47
3.3.3 正突變菌株的性能考察 47-48
3.3.3.1 耐溫能力測定結(jié)果 47-48
3.3.3.2 產(chǎn)酸能力測定結(jié)果 48
3.3.4 突變菌株的遺傳穩(wěn)定性分析 48-49
3.4 本章小結(jié) 49-50
第四章 突變菌株TL1的發(fā)酵條件優(yōu)化 50-54
4.1 材料 50
4.2 實驗方法 50
4.2.1 突變株TL1菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化 50
4.2.1.1 玉米粉濃度對TL1菌株生長的影響 50
4.2.1.2 麩皮濃度對TL1菌株生長的影響 50
4.2.1.3 最佳發(fā)酵條件的確定 50
4.3 結(jié)果與討論 50-53
4.3.1 玉米粉濃度對TL1菌株生長的影響 50-51
4.3.2 麩皮濃度對TL1菌株生長的影響 51
4.3.3 最佳發(fā)酵條件的確定 51-53
4.4 本章小結(jié) 53-54
第五章 利用耐高溫乳酸菌進行青貯試驗 54-62
5.1 材料 54
5.2 實驗方法 54-57
5.2.1 青貯飼料的調(diào)制 54-55
5.2.2 樣品處理 55
5.2.3 發(fā)酵過程中各種菌數(shù)量的變化 55
5.2.4 不同處理組感官評定結(jié)果 55-56
5.2.5 青貯飼料主要成份分析 56-57
5.2.6 飼喂效果試驗研究 57
5.3 結(jié)果與討論 57-60
5.3.1 發(fā)酵過程中各種菌數(shù)量的變化結(jié)果 57-58
5.3.2 不同處理組感官評定結(jié)果 58
5.3.3 青貯飼料主要成份分析 58-60
5.3.4 飼喂效果試驗研究結(jié)果 60
5.4 本章小結(jié) 60-62
第六章 耐高溫乳酸菌在垃圾堆肥處理中的應(yīng)用 62-68
6.1 材料 62
6.2 實驗方法 62-63
6.2.1 菌種培養(yǎng)及堆肥樣品制備 62
6.2.2 堆肥過程一般工藝參數(shù)測定 62-63
6.3 結(jié)果與討論 63-67
6.3.1 溫度的變化 63
6.3.2 含水率的變化 63-64
6.3.3 pH值的變化 64-65
6.3.4 揮發(fā)性有機質(zhì)含量的測定 65-66
6.3.5 種子發(fā)芽指數(shù)(GI) 66-67
6.4 本章小結(jié) 67-68
第七章 結(jié)論與展望 68-70
7.1 結(jié)論 68-69
7.2 展望 69-70
參考文獻 70-77

……略

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